在基層動物疫病檢疫、疫苗免疫效果評價以及實踐應(yīng)用中，微量移液器的使用越來越普及。 在使用微量移液器的過程中，存在很多問題，其中嚴重、普遍的問題是微量移液器的不規(guī)范使用， 不規(guī)范使用又可引發(fā)諸多問題，最終影響實驗結(jié)果。

1、選擇移液器

在 96 孔微量板上操作， 所需血清的量一般為 25滋l。 因此，所用的微量移液器量程與 25滋l 接近為， 因為量程越接近目標體積，移液準確性越好[6]。如果選用的移液器其量程與目標體積相差過大則不合適。比 如，用量程小于 25滋l 的移液器吸取 25滋l，則至少需要 2 次操作，操作次數(shù)增加，引起誤差的幾率可能就會相應(yīng)增加；如果用量程遠大于 25滋l 比如 200滋l 或者以上的移液器吸取 25滋l，則賽多利斯移液器內(nèi)部的活塞處于高壓狀態(tài)，在整個實驗多步驟操作過程中，活塞始終如此。久而久之，活塞可能受損而影響移液的準確性。

2、調(diào)節(jié)量程

順時針調(diào)節(jié)則增加量程，逆時針調(diào)節(jié)則減少量程[7]。移液器不用時，其量程一般放到（活塞松弛不受壓）。 因此，吸取 25滋l 液體時，一般需要將移液器的量程調(diào)小。 調(diào)節(jié)時慢慢逆時針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)按鈕，特別是快到目標量程時，更要緩慢仔細。整個調(diào)節(jié)過程速度都不宜過快，否則徒增磨損。在實驗操作中，如果需要從小量程調(diào)節(jié)到大量程，則慢慢順時針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)按鈕，調(diào)至超過目標量程至少 1/4 圈處，再反轉(zhuǎn)重新調(diào)節(jié)至目標量程。 這樣做，可排除機械間隙，使得目標量程值準確可靠[8]。量程的調(diào)節(jié)，無論調(diào)小或者調(diào)大，動作均應(yīng)輕緩，調(diào)節(jié)的范圍均應(yīng)在移液器的量程范圍之內(nèi)。 否則，易造成移液器損壞而影響準確度。

賽多利斯移液器mLINE系列

3、安裝吸頭

吸頭與移液器相配套。 吸頭要筆直，彎曲了則應(yīng)棄用。 使用非原裝吸頭時，若同規(guī)格吸頭的長度和尖端直徑有明顯差別，則應(yīng)該選用其長度和直徑一致的，否則會影響移液的準確度[10]。

安裝吸頭時，稍用力將移液器下端垂直插入吸頭，再小幅度左右旋轉(zhuǎn)即可。 安裝時不宜用力過猛或使勁跺移液器，用力過猛，吸頭會套得太緊難以脫卸，也會增加吸嘴在強力摩擦下的磨損，長此以往移液器的密封性會受到影響。 使勁跺移液器，則易使其內(nèi)部結(jié)構(gòu)松弛而影響移液的準確度。

4、檢查密合性

吸取 25滋l 所用的移液器量程小， 可以采用以下方法檢測移液器的氣密性： 吸取 25滋l液體后，將吸頭尖端垂直浸入液面不動，觀察1min 左右，如果吸頭內(nèi)液面不下降，說明移液器不漏液，否則漏液[11]。 如果漏液，需檢查吸頭是否旋緊、活塞是否正常等。

5、吸取液體

吸取液體之前，將移液器、吸頭、96 孔微量板、試管架、液體等事前放置于工作環(huán)境，使它們處于相同溫度，接近于室溫。 因為移液器的理想移液溫度是 21.5℃（±1℃），在恒溫下移液效果較好[12]。吸取液體時，先潤洗吸頭再吸取液體。 具體做法如下：四指握住移液器，大拇指按下移液器頂端按鈕至第一停點不動（吸頭內(nèi)的空氣被排出），將吸頭尖端垂直沒入液面下，再慢慢松開大拇指但大拇指不離開按鈕，勻速吸取液。體。 液體吸取完畢，按鈕也同時回到原點。 此 時，吸頭尖端不要離開液面，將大拇指按下移液器頂端按鈕至第一停點，將吸頭內(nèi)的液體排出。 如此反復(fù)吸、放 3~5 次來潤洗吸頭。 之后，按照上述方法吸取液體。吸取液體時有幾點需要注意：一是潤洗頭，正式吸取液體之前，將吸頭潤洗幾遍，使吸頭內(nèi)外形成同一液膜， 減少排液量的誤差[13]。二是要垂直吸取液體， 若傾斜著吸取液體，吸取量則會變大[11]。 三是吸頭尖端插入液面之前要排出吸頭內(nèi)的空氣，否則吸頭內(nèi)的空氣會進入液體里，產(chǎn)生氣泡，影響實驗操作和實驗結(jié)果， 這在 96 孔微量反應(yīng)板上進行血清倍比稀釋時要特別注意。四是吸頭尖端要始終保持在液面下，即吸頭尖端跟隨液面走，液面下降吸頭也下降，液面上升吸頭也上升，這樣可以保證吸始終能吸上液體且吸頭尖端以上的部分不粘上液體。五是按壓下去的大拇指要慢慢松開而絕非突然松開至按鈕回到原點，大拇指松開過快，吸取的液體可能會沖入移液器內(nèi)造成污染或是吸取的液體達不到所需的體積。六是吸液完成之后略停一下，再將移液器吸頭尖端移出液面。